Luận văn Xác định một số tính chất hóa lý và đặc điểm cấu trúc của Pectin từ cỏ biển Enhalus Acoroides ở Khánh Hòa

Nội dung tài liệu: Luận văn Xác định một số tính chất hóa lý và đặc điểm cấu trúc của Pectin từ cỏ biển Enhalus Acoroides ở Khánh Hòa

1. BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ ---------------------------------- Huỳnh Ánh Quốc XÁC ĐỊNH MỘT SỐ TÍNH CHẤT HĨA LÝ VÀ ĐẶC ĐIỂM CẤU TRƯC CỦA PECTIN TỪ CỎ BIỂN ENHALUS ACOROIDES Ở KHÁNH HÕA LUẬN VĂN THẠC SĨ HĨA HỌC Nha Trang – 2020
2. BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ ------------------------------------- Huỳnh Ánh Quốc XÁC ĐỊNH MỘT SỐ TÍNH CHẤT HĨA LÝ VÀ ĐẶC ĐIỂM CẤU TRƯC CỦA PECTIN TỪ CỎ BIỂN ENHALUS ACOROIDES Ở KHÁNH HÕA Chuyên ngành: Hĩa phân tích Mã số: 8440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ HĨA HỌC CÁN BỘ HƢỚNG DẪN KHOA HỌC TS Phạm Đức Thịnh Nha Trang – 2020
3. LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan đây là cơng trình nghiên cứu của bản thân tơi dƣới sự hƣớng dẫn của TS. Phạm Đức Thịnh và tham khảo thêm các tài liệu đã đƣợc cơng bố trƣớc đĩ cĩ nguồn gốc rõ ràng. Các số liệu nêu trong luận văn là kết quả làm việc của tơi trong suốt quá trình thực nghiệm tại Viện Nghiên cứu và Ứng dụng cơng nghệ Nha trang, Viện Hàn lâm Khoa học và Cơng nghệ Việt Nam và tại đơn vị Trung tâm Kiểm sốt bệnh tật nơi tơi đang cơng tác. Nha Trang, tháng 12 năm 2020 Tác giả Huỳnh Ánh Quốc
4. LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Lãnh đạo Học viện Khoa học và Cơng nghệ Việt Nam, Ban chủ nhiệm Khoa Hĩa học và Phịng Đào tạo đã tổ chức cơng tác giảng dạy, tạo mọi điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn thiện luận văn và các thủ tục cần thiết. Tơi xin gửi lời cám ơn chân thành và sâu sắc đến thầy TS. Phạm Đức Thịnh – Phĩ Viện trƣởng Viện nghiên cứu và Ứng dụng cơng nghệ Nha Trang đã luơn tận tâm, nhiệt tình giúp đỡ, hƣớng dẫn và cho tơi nhiều gĩp ý trong suốt thời gian thực hiện đề tài. Bên cạnh đĩ, tơi chân thành cảm ơn sự giúp đỡ và tạo điều kiện về mọi mặt của Lãnh đạo Viện Nghiên cứu và Ứng dụng Cơng nghệ Nha Trang cũng nhƣ các anh chị em cơng tác tại phịng Hĩa Phân tích đã tạo mọi điều kiện tốt nhất để tơi làm thực nghiệm và luơn động viên, giúp đỡ để tơi hồn thành đề tài luận văn này. Trong quá trình thực hiện luận văn tốt nghiệp, tơi cũng đã nhận đƣợc nhiều sự quan tâm, giúp đỡ của các thầy cơ, bạn bè và gia đình để hồn thành luận văn. Tơi xin cảm ơn Trung tâm Kiểm sốt bệnh tật Ninh Thuận, đơn vị tơi đang cơng tác đã tạo kiện cho tơi thời gian thực hiện khĩa luận. Cuối cùng tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc nhất đến gia đình, ngƣời thân và bạn bè đã luơn bên cạnh chia sẽ khĩ khăn và động viên giúp tơi hồn thành khĩa luận tốt nghiệp này. Xin chân thành cảm ơn! Nha Trang, tháng 12 năm 2020 Học viên Huỳnh Ánh Quốc
5. DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt As Arsen Asen Albumin huyết thanh BSA Bovine Serum Albumin bị Cd Cadmium Cadmi Carbon-13 NMR 13C-NMR Phổ CHTHN Carbon 13 Spectroscopy DE Degree of esterification Mức độ ester hĩa DMSO Dimethylsulfoxide Dimetylsulfoxide DMSP Dimethylsulfoniopropionate Dimetylsulfopropionat 1,1-diphenyl-2- 1,1-diphenyl-2- DPPH picrylhyrazyl picrylhyrazyl DW Dry weight Trọng lƣợng khơ EtOH Ethanol Etanol Fuc Fucose Đƣờng fucose Fucf Fucofuranose Fucofuranose Fucp Fucopyranose Fucopyranose Gal Galactose Đƣờng galactose GalpA Galactosyluronic Galactosyluronic GIT Gastrointestinal tract Đƣờng tiêu hĩa
6. GlcpA Glucoronosyl acid Acid glucoronosyl Gluc Glucose Đƣờng glucose GlucA Glucuronic acid Acid glucuronic Gly Glycoside Glycoxit Gel permeation GPC Sắc ký lọc gel chromatography Lipoprotein cĩ tỉ trọng HDL High Density Lipoprotein cao HG Homogalacturonan Homogalacturonan HM High Methoxyl Metoxyl hĩa cao Pectin cĩ độ metoxyl HMP High Methoxyl Pectin hĩa cao High Performance Liquid Sắc ký lỏng hiệu năng HPLC Chromatography cao 1H-NMR Proton NMR Spectroscopy Phổ CHTHN proton Dịng tế bào gây ung thƣ HT29 Colorectal cancer cell line ruột kết IR Infrared Spectroscopy Phổ hồng ngoại Lipoprotein cĩ tỉ trọng LDL Low Density Lipoprotein thấp LM Low Methoxyl Metoxyl hĩa thấp LMP Low Methoxyl Pectin Pectin cĩ độ metoxyl
7. hĩa thấp Man Mannose Đƣờng mannose MDR Multidrug resistant Đa kháng thuốc MeOH Methanol Metanol MI Methoxyl Index Chỉ số metoxyl MT Metallothioneins Metallotionein Nuclear Magnetic Cộng hƣởng từ hạt nhân NMR Resonance (CHTHN) PC Phytochelatin Phytochelatin RG-I Rhamnogalacturonan I Ramnogalacturonan RG-II Rhamnogalacturonan II Ramnogalacturonan II Rhap Rhamnosyl Ramnosyl TFA Trifluoroacetic axid Acid trifluoroacetic United Nations Chƣơng trình mơi UNEP Environment Programme trƣờng Liên hiệp quốc XGA Xylogalacturonan Xylogalacturonan Xyl Xylose Đƣờng xylose Xylp Xylosyl Gốc xylosyl
8. DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Hàm lƣợng pectin trong các loại nguyên liệu khác nhau 19 Bảng 3.1: Các giá trị mật độ quang mẫu chuẩn chuẩn xác định hàm lƣợng carbohydrate tổng bằng phƣơng pháp phenol – acid sulfuric . . ...55 Bảng 3.2: Các giá trị mật độ quang của mẫu chuẩn xác định hàm lƣợng uronic acid bằng phƣơng pháp Carbazole .. . ...56 Bảng 3.3: Thành phần hĩa học của pectin từ E. acoroides . .. .57 Bảng 3.4: Các giá trị mật độ quang của mẫu chuẩn xác định hàm lƣợng sulfate bằng phƣơng pháp K2SO4 . . ..58 Bảng 3.5: Thành phần monosaccharide của pectin từ các lồi khác nhau . . . ..61 Bảng 3.6: Các chỉ số đặc trƣng của pectin từ phần rễ, thân và lá của cỏ biển E.acoroides ..65
9. DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1: Hình thái chung của cỏ biển ..9 Hình 1.2: Cỏ biển Enhalus acoroides . . ..11 Hình 1.3: Cấu trúc hĩa học của pectin .. ..20 Hình 1.4: Pectin trong cấu tạo của thành tế bào thực vật ....21 Hình 1.5: Các dạng cấu trúc hĩa học của pectin .22 Hình 1.6: Cấu trúc của pectin cĩ mức độ methoxyl hĩa cao . ..23 Hình 1.7: Cấu trúc của pectin cĩ mức độ methoxyl hĩa thấp .23 Hình 1.8: Cấu trúc chính của homogalacturonan 24 Hình 1.9: Mơ hình đặc điểm cấu trúc của Rhamnogalacturonan-I ..25 Hình 2.1: Các bộ phận của cỏ biển Enhalus acoroides. .40 Hình 2.2: Sơ đồ khối về nội dung nghiên cứu của đề tài. ...43 Hình 2.3: Sơ đồ chiết tách và thu nhận pectin từ cỏ biển ... ...44 Hình 3.1: Sự phân bố hàm lƣợng pectin trong cỏ biển E.acoroides ...52 Hình 3.2: Các giai đoạn xử lý cỏ biển .52 Hình 3.3: Dịch chiết pectin ..53 Hình 3.4: Chế phẩm pectin thơ sau khi sấy khơ ..53 Hình 3.5: Đƣờng chuẩn xác định hàm lƣợng carbohydrate ...55 Hình 3.6: Đƣờng chuẩn xác định hàm lƣợng uronic acid ..56 Hình 3.7: Thành phần hĩa học của 2 phân đoạn pectin từ E.acoroides .........57 Hình 3.8: Đƣờng chuẩn xác định hàm lƣợng sulfat . ...59 Hình 3.9: Sắc ký đồ HPLC của các mẫu đƣờng đơn chuẩn 60 Hình 3.10: Sắc ký đồ HPLC mẫu pectin chiết tách từ cỏ biển E.acoroides 60 Hình 3.11: Phổ IR của phân đoạn F2 – rễ của cỏ biển E.acoroides ...66 Hình 3.12: Phổ IR của phân đoạn F2 – thân của cỏ biển E.acoroides .. ..66
10. Hình 3.13: Phổ IR của phân đoạn F2 – lá của cỏ biển E.acoroides ...67